ELISpot und FluoroSpot

Quantifizierung von Immunantworten auf Einzelzellebene

Mabtech ist ein schwedisches Biotech-Unternehmen, das 1986 aus der Abteilung für Immunologie der Universität Stockholm hervorgegangen ist.

Mabtech entwickelt und produziert hochwertige monoklonale Antikörper sowie Kits für ELISA, ELISpot und FluoroSpot und ist weltweit führend bei der Weiterentwicklung der ELISpot- und FluoroSpot-Methoden.

Erfahren Sie mehr über ELISpot- und FluoroSpot-Anwendungen.

ELISpot

ELISpot ist ein zuverlässiger und unkomplizierter Assay zum Nachweis und zur Quantifizierung antigenspezifischer Immunantworten auf Einzelzellniveau.

Der ELISpot-Assay detektiert Zytokine unmittelbar nach der Sekretion, im Gegensatz zu Messungen, die durch Rezeptorbindung oder Proteaseabbau verfälscht werden. Mit Nachweisgrenzen von bis zu einer Zelle unter 250.000 ist ELISpot einer der empfindlichsten zellulären Assays. Er wird in einer 96-Well-Platte durchgeführt, und zur Analyse wird ein automatisierter ELISpot-Reader verwendet. Der Assay ist daher einfach durchzuführen und ermöglicht die schnelle Analyse einer großen Anzahl von Proben.

ELISpot im Überblick:

• Sensitiver Immunassay
• Misst die Sekretion von Zytokinen
• Einfach durchzuführen
• Robust und leicht zu standardisieren
• Geeignet für groß angelegte Studien, auch unter Feldbedingungen

Abb.: Schematische Darstellung des Prinzips des ELISpot-Assays

ELISpot von Mabtech steht für Qualität durch und durch. Sie erhalten mehr als nur ein Kit. Sie erhalten jahrelange Erfahrung in der Assay-Entwicklung, optimierte Protokolle und die Werkzeuge, die Sie benötigen, um zuverlässige Daten zu generieren, die Ihre Forschung und Therapieentwicklung voranbringen.

• Jahrzehntelange Expertise: Seit 40 Jahren widmet sich Mabtech der Weiterentwicklung der ELISpot-Technologie – mit bewährten Antikörpern und Kits, die in Tausenden von begutachteten Studien und klinischen Studien zum Einsatz kommen.
• Außergewöhnliche Sensitivität: Erkennt selbst die seltensten antigenspezifischen T- und B-Zellen und stellt sicher, dass keine wichtige Reaktion übersehen wird.
• Eigene Antikörperentwicklung: Proprietäre monoklonale Antikörper bieten unübertroffene Spezifität und Affinität, Charge für Charge.

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FluoroSpot

FluoroSpot ist die Multiplex-Version von ELISpot. Genau wie bei ELISpot werden die von den Zellen sekretierten Zielproteine unmittelbar nach der Sekretion und während der gesamten Stimulation von spezifischen Antikörpern gebunden, was das Verfahren zu einem äußerst sensitiven Sandwich-Assay macht. Der Unterschied zu ELISpot liegt in der Art der Detektion: Während ELISpot auf einer enzymatischen Reaktion basiert, nutzt FluoroSpot die Fluoreszenz.

FluoroSpot von Mabtech steht für Qualität durch und durch. Sie erhalten mehr als nur ein Kit – Sie erhalten jahrelange Assay-Innovation, optimierte Protokolle und die Werkzeuge, die Sie benötigen, um Daten zu generieren, auf die Sie sich verlassen können, um Ihre Forschung und Therapieentwicklung voranzutreiben.

• Jahrzehntelange Erfahrung: Die ersten FluoroSpot-Kits von Mabtech kamen 2008 auf den Markt, und seitdem wurde die Technologie kontinuierlich weiterentwickelt. Die bewährten Antikörper und Kits von Mabtech wurden bereits in Hunderten von begutachteten Studien und klinischen Studien eingesetzt.
• Außergewöhnliche Sensitivität: FluoroSpot ist hunderte Male sensitiver als die intrazelluläre Färbung in der Durchflusszytometrie. Es erkennt selbst die seltensten antigenspezifischen T- und B-Zellen und stellt so sicher, dass keine wichtige Reaktion unentdeckt bleibt.
• Polyfunktionale Bewertung: Die Multiplex-Fähigkeit von FluoroSpot ermöglicht die Bewertung von Zellen, die mehr als einen Analyten sekretieren, und liefert so noch detailliertere Einblicke in das Immunsystem.
• Relatives Spotvolumen: Der patentierte RAWspot™-Algorithmus ermöglicht die Messung der relativen Menge des sekretierten Analyten von Interesse und liefert so differenziertere Erkenntnisse für Ihr Immunprofil.
• Eigene Antikörperentwicklung: Proprietäre monoklonale Antikörper bieten unübertroffene Spezifität und Affinität, Charge für Charge.

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Anwendungen

Anwendungen bei T-Zellen

ELISpot und FluoroSpot werden häufig zur Untersuchung antigenspezifischer Immunantworten und zur Unterscheidung zwischen Subpopulationen aktivierter T-Zellen eingesetzt. Dies findet Anwendung in der Erforschung von Infektionskrankheiten, Krebs, Allergien und Autoimmunerkrankungen.

Immuntherapie

Sowohl ELISpot als auch FluoroSpot sind leistungsstarke Wirksamkeitstests in der Entwicklung von CAR-T-, TIL- und Gentherapien, die klare Einblicke in die Freisetzung von Zytokinen wie IFN-γ, Granzym B und TNF-α aus gentechnisch veränderten T-Zellen oder viral transduzierten Zellen liefern. Diese Assays entsprechen den Empfehlungen der FDA für Wirksamkeitstests in der Immuntherapie.

Infektionskrankheiten

ELISpot ist für die Kartierung zellulärer Immunantworten in der Infektionsforschung – von TB und SARS-CoV-2 bis hin zu Malaria und HIV – unverzichtbar, da es pathogen-spezifische zytokinproduzierende Zellen quantifiziert. Die Sensitivität und Robustheit des Assays auf Einzelzellniveau machen ihn zu einem Schlüsselwerkzeug sowohl für diagnostische als auch für impfstofforientierte Untersuchungen.

Impfstoffforschung

In der Impfstoffforschung ist der IFN-γ-ELISpot der Goldstandard zur Bestimmung der Impfstoffwirksamkeit durch Messung der Fähigkeit, starke T-Zell-Reaktionen auszulösen. Der IFN-γ/IL-2/TNF-α-FluoroSpot wird häufig eingesetzt, um die Impfstoffwirksamkeit durch Messung der Fähigkeit zur Auslösung starker T-Zell-Reaktionen zu bestimmen. IFN-γ/IL-2/Granzym-B-FluoroSpot ist eine weitere hervorragende Kombination zur Bewertung sowohl von Th1- als auch von zytotoxischen T-Zellen in derselben Vertiefung, wodurch wertvolle Proben eingespart werden.

Diagnostische Assays auf ELISpot-Basis sind ebenfalls anwendungsfertig erhältlich, darunter Tests zum Nachweis von Patienten mit Tuberkulose oder einer SARS-CoV-2-Infektion durch Messung der IFN-γ-Sekretion von T-Zellen, die auf definierte Antigene reagieren. ELISpot ist dabei nicht auf IFN-γ beschränkt. Mabtech bietet ELISpot für über 40 verschiedene Zytokine und andere Analyten an, um all Ihre Forschungsfragen zu beantworten.

Die ELISpot-Assays von Mabtech sind für die gesamte Bandbreite an Zytokinen erhältlich:

Anwendungen bei B-Zellen

B-Zell-ELISpot und B-Zell-FluoroSpot sind zwei der wenigen Assays, mit denen Immunglobuline direkt nach ihrer Sekretion gemessen werden können. Man kann die gesamte Immunglobulinssekretion durch antikörpersekretierende Zellen (ASCs) oder Gedächtnis-B-Zellen sowie die antigenspezifischen B-Zell-Reaktionen beider Zelltypen untersuchen, wobei das Antigen von Interesse als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet wird.

Nachweis akuter oder Gedächtnis-B-Zell-Reaktionen

B-Zell-ELISpot kann zur Beantwortung verschiedener Forschungsfragen in der Infektions- und Impfstoffforschung eingesetzt werden. Man kann frühe akute ASC-Reaktionen nach einer Impfung oder während einer Infektion bewerten, indem die Zellen direkt aus Spenderblut isoliert und im Assay verwendet werden. Darüber hinaus können Forscher die durch einen Impfstoff oder nach einer Infektion ausgelöste Gedächtnis-B-Zell-Reaktion bewerten, um die Langlebigkeit der B-Zell-Reaktion zu beurteilen. Hier werden isolierte PBMCs mit polyklonalen Aktivatoren stimuliert, um Gedächtnis-B-Zellen zur Sekretion von Antikörpern für die Auswertung im Assay anzuregen.

Bewertung kreuzreaktiver B-Zellen

Der B-Zell-FluoroSpot beantwortet Forschungsfragen in der Infektions- und Impfstoffforschung. Man kann damit mehrere Immunglobulin-Isotypen, Subklassen und sogar Antigene bewerten. Durch die Verwendung des Reverse B-Zell-FluoroSpot können mehrere Antigene eingesetzt werden, um einzelne und kreuzreaktive B-Zellen nachzuweisen. Dies erweitert Ihre B-Zell-Forschung um neue Dimensionen und kann als Orientierung für die Entwicklung und Bewertung neuer Impfstoffe dienen.

ELISpot-Assays für humane Immunglobuline:

Weitere Spezies verfügbar.

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18.05.2026